RNA干擾整體實(shí)驗(yàn)服務(wù)—SiRNA實(shí)驗(yàn)
第二部分:細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染以及siRNA的篩選
一、細(xì)胞培養(yǎng)
使用10%胎牛 DMEM培養(yǎng)液,37℃下置于5%CO2培養(yǎng)箱中。待細(xì)胞融合至80%,用0.25%胰酶消化傳代后接種(細(xì)胞密度5 XlO4)于培養(yǎng)瓶或孔板,待細(xì)胞融合至約70%后用于實(shí)驗(yàn)。以下圖片均用顯微鏡100X拍照
YYYY細(xì)胞圖片如下:
1)細(xì)胞培養(yǎng)方法:略
二、細(xì)胞轉(zhuǎn)染
材料:YYYY細(xì)胞;XXXX基因siRNA(20Μm, 合成);Lipofectamine 2000試劑(使用前貯存在+4℃);Opti-MEM I...