全部產(chǎn)品分類
品牌 |
Annoron-安諾倫 | 貨號(hào) |
AS050147-AS050148 | |||||||||||||||
產(chǎn)品分類 |
PCR系列 | 研究領(lǐng)域 |
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PNGase F (with His-tag) REF: AS050147-AS050148 儲(chǔ)運(yùn)條件 -20℃
產(chǎn)品組成
產(chǎn)品簡(jiǎn)介 PNGase F（肽 N- 糖苷酶 F）來(lái)源于 Elizabethkingiamiricola， 是一種高效的酰胺水解酶，可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖、雜 合和復(fù)雜的寡糖糖蛋白。 PNGase F 的切割位點(diǎn)為糖蛋白內(nèi)側(cè) N- 乙 酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵，同時(shí)將酶解 后蛋白上的天冬氨酰轉(zhuǎn)化為天冬氨酸。 本產(chǎn)品通過(guò)大腸桿菌重組表達(dá)， 帶有 His 標(biāo)簽， 含有 50% 甘油， 常應(yīng)用于抗體及其相關(guān)蛋白去糖基化。
酶活單位定義 1 個(gè)酶活力單位 (U) 指在 10 μl 反應(yīng)體系中， 37℃下反應(yīng) 1 h 從 10 μg 變性 RNase B 中除去超過(guò) 95% 碳水化合物所需要的酶量。
失活條件 75℃溫育 10 min。
質(zhì)量控制 蛋白純度檢測(cè) 使用 SDS-PAGE 凝膠電泳檢測(cè)，蛋白純度不低于 95%。 糖苷酶與蛋白酶活性檢測(cè) 無(wú)可檢出的內(nèi)切糖苷酶 F1、F2 或 F3 活性；無(wú)可檢出的蛋白酶活性。
使用方法 1. 變性條件下去糖基化 ① 將 1~20 μg 糖蛋白， 1 μl 10× Denaturing Bu?er 和 ddH2O （如 有必要）混合至總體積 10 μl； 注： 10 × Denaturing Buffer 在低溫儲(chǔ)存時(shí)可能出現(xiàn)白色沉淀， 使用前可先在 37℃下溫育使其溶解。 ② 100℃反應(yīng) 10 min 使糖蛋白變性后，冰上冷卻，離心 10 s； ③ 加入 2 μl 10× PNGase F Bu?er，2 μl 10% NP-40 ，補(bǔ)充 ddH2O 使總反應(yīng)體積為 20 μl； ④ 加入 1~2 μl PNGase F，輕輕混勻， 37℃孵育 1~3 h。
2. 非變性條件下去糖基化 ① 將 1~20 μg 糖蛋白， 2 μl 10× PNGase F Bu?er 和 ddH2O （如 有必要）混合至總體積 20 μl； ② 加入 2~5 μl PNGase F, 輕輕混勻； ③ 37℃ 孵育 4~24 h。
PNGase F 的去除 本產(chǎn)品帶有 His 標(biāo)簽，反應(yīng)后可選擇與目標(biāo)糖蛋白不同的標(biāo)簽， 通過(guò)親和層析將 PNGase F 去除。 |
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數(shù)量 |
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| 選擇 | 品牌 | 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 研究領(lǐng)域 | 說(shuō)明書 | 數(shù)量 | 目錄價(jià) | |
| 1 | Annoron-安諾倫 | AS050038 | Taq SYBR? Green qPCR Premix (Universal) | PCR系列 |
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￥0.00 | 訂購(gòu) 詢價(jià) | |||
| 2 | Annoron-安諾倫 | AS050100 | T4 DNA Ligase(Fast) | PCR系列 |
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￥0.00 | 訂購(gòu) 詢價(jià) | |||
| 3 | Annoron-安諾倫 | AS050125 | PBS | PCR系列 |
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￥0.00 | 訂購(gòu) 詢價(jià) |
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