大腸桿菌表達系統(tǒng)是基因表達技術(shù)中發(fā)展最早、應(yīng)用最廣且最為經(jīng)濟實惠的經(jīng)典表達系統(tǒng)。利用該系統(tǒng)表達重組蛋白具有許多優(yōu)越性:細胞遺傳背景清楚、目的基因表達水平高、培養(yǎng)周期短、純化方便、穩(wěn)定性好、抗污染能力強、易于放大和適用于多種屬蛋白的表達但是仍然存在著表達量低、蛋白活性低、易形成包涵體和含有內(nèi)毒素等問題。
大腸桿菌表達系統(tǒng)簡介:
1. 代謝途徑和基因表達調(diào)控機制比較清楚
全基因組測序,共有4405個開放性閱讀框
2.基因克隆表達系統(tǒng)成熟完善
繁殖迅速,培養(yǎng)簡單,操作方便,遺傳穩(wěn)定。
3.培養(yǎng)周期短
大腸桿菌繁殖能力強,在營養(yǎng)條件充足時,20~30mins即可繁殖一代;大規(guī)模發(fā)酵成本低,具有巨大的生存潛力。
4. 目標基因表達水平高
表達水平較一般真核表達系統(tǒng)高,某些外源因在大腸桿菌中的表達可達總蛋白的5%~30%。
5. 遺傳背景清楚
對大腸桿菌的遺傳背景和生理特性研究相當清楚,已有多種不同抗藥性、不同營養(yǎng)缺陷型和不同校正突變型的菌株供選擇使用。
6.抗污染能力強,下游工藝簡單,易于控制
已有大量可供選擇利用的表達載體,被美國FDA批準為安全的基因工程受體菌。
制備高質(zhì)量、高純度、高天然保真性的蛋白,是許多實驗關(guān)鍵性的第一步。
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