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安諾倫代理Complement Technology高質(zhì)量補體試劑——人補體C1q蛋白

時間:2023-08-16 作者:安諾倫 文章來源: 瀏覽:322

Complement Technology,Inc. (CompTech)致力于為生物醫(yī)學研究界提供最高質(zhì)量的補體試劑。CompTech為世界各地的科學家提供最優(yōu)質(zhì)的試劑,并繼續(xù)將新的試劑添加到列表中。CompTech致力于推進醫(yī)學研究,為補體試劑在補體領(lǐng)域以及其他相關(guān)科學領(lǐng)域的應(yīng)用中使用補體試劑提供的技術(shù)建議和專業(yè)知識。

熱銷備貨介紹——人補體C1q蛋白A099

名稱: C1q蛋白

編號: A099

規(guī)格: 1000 μg/vial

濃度: 1.0 mg/mL (實際濃度見分析證書)

類型冷凍液體

活動: > 1,000,000 C1H50 units/mg

純度: > 98%的SDS頁面

緩沖區(qū): 10 mM HEPES,300 mM氯化鈉,pH 7.2

消缺系數(shù) A280 nm=為0.68, 1.0 mg/ml

分子量: 410000Da ( 18鏈)

防腐劑: 無,0.22μm過濾。

存儲: - 7 0oC或以下。避免凍融。

根源正常的人類血清 (經(jīng)認證的HBsAg、HTLV-I/II、STS和HCV、 HIV1和HIV-II抗體檢測均為陰性) 。

預防措施在處理人類血液制品時要采取常規(guī)的預防措施。

一般說明:

從C1r和C1以及其他穩(wěn)定蛋白中分離出來的C1q往往很容易聚集。由于它在許 多研究實驗室中被分離和研究,許多緩沖液被用于穩(wěn)定濃縮的C1q和防止聚集。大約 一半的科學家喜歡高鹽,另一部分科學家喜歡儲存緩沖液中40%的甘油。

因此, CompTech在高鹽緩沖液A099和高鹽緩沖液A100加40%甘油中均銷售1 mg/mL的C1q)。 該公司沒有檢測到在功能活性、存儲穩(wěn)定性或聚集性方面的可測量的差異,但在研 究界仍然存在強烈的偏好。

C1q是從正常人血漿中純化出來的。C1q是C1復合物的一部分,該復合物是級 聯(lián)反應(yīng)中的第一個補體成分,稱為經(jīng)典補體途徑。C1實際上是三種不同蛋白質(zhì) (C1q 、C1r和C1) 結(jié)合在鈣依賴復合物中的非共價組裝。C1q有6個延伸的臂,每個臂的末 端都有一個結(jié)構(gòu)域,與免疫球蛋白的Fc結(jié)構(gòu)域結(jié)合。當抗體與抗原結(jié)合形成免疫復合物時,它們聚集在一起,使C1q的六個臂中的兩個或多個與抗體的Fc結(jié)構(gòu)域結(jié)合,如IgG或IgM。多個臂與免疫復合物的結(jié)合導致復合物中的兩個C1r蛋白 (蛋白酶酶原) 自動激活產(chǎn)生兩個C1r蛋白酶,切割并激活復合物中的兩個c1蛋白酶酶原。活化的C1s 裂解補體成分C4,釋放C4a,并啟動C4b與活化表面的共價附著在活化表面。激活的 C1s也能切割C2,C2的較大片段與表面附著的C4b結(jié)合,形成C4b,C2a,這是經(jīng)典途徑 的C3/C5轉(zhuǎn)化酶。

物理特性和結(jié)構(gòu)

C1q是一個由18個多肽鏈組成的高分子量復合物。C1q的六個臂中的每一個都 包含三條鏈,一條a鏈 (26000道爾頓) ,一條B鏈 (25000道爾頓) 和一條C鏈 (2400 0道爾頓) 。這三條鏈被卷曲成類膠原蛋白三螺旋結(jié)構(gòu)大約超過其一半的長度。這個膠原蛋白區(qū)域的一半形成了一個中心核心, 在這里所有的18條鏈聚集在一起。這些鏈通過A-B和C-C模式中的二硫化物連接在這個核心中。在膠原蛋白區(qū)域的中心有一個彎曲,使手臂彼此向外伸展。膠原臂遠端的球 狀頭具有免疫球蛋白Fc結(jié)構(gòu)域的結(jié)合位點。

C1復合物由一個C1q分子 (410000道爾頓) 、兩個C1r分子 (92000道爾頓) 和 兩個C1s分子 (86000道爾頓) 組成。該復合物在鈣的存在下是穩(wěn)定的,但如果鈣被去 除,很容易解離。當C1被激活時,C1r和C1s亞基由于蛋白水解激活而分別分裂成兩個 鏈分子。因此,C1的SDS凝膠圖樣非常復雜。

功能:

C1q的生物學功能在上述一般描述和物理特性部分中描述。C1q的功能活性可以 用C1q耗盡的血清 (CompTech #A300) 和EA細胞 (CompTech #B200) 來檢測。這些檢 測方法對C1q極其敏感,在測量EA細胞裂解的檢測方法中,通常產(chǎn)生50%的裂解,小于 2 ng的裂解(Dodds,A。W.和Sim,R。B. (1997) ;摩根,B。P.

測定

經(jīng)典途徑活性的單位是CH50。一個類似的單元,C1qH50,被用來定量C1q的活 性。一個C1qH50單元是溶解3 x 10的50%所需的功能性C1q的量7當一定量的C1q (Comp Tech #A099或A100) 與5-20μL的C1q-Dpl在GVB中孵育時,EA細胞 (抗體致敏的綿羊紅 細胞 (CompTech #B200) ) ++ (比較技術(shù)#B100) ,總體積為500μL,30 min,37 minoC.這個數(shù)量的C1q表明了對C1q檢測的敏感性,通常為1 ng C1q與10μL C1q-Dpl (Dodds,A。W.和Sim,R。B. (1997) ;摩根,B。P. (2000)).有關(guān)批次的具體值, 請參見分析證書。

應(yīng)用程序

C1q用于覆蓋ELISA板,以捕獲和定量臨床樣本中的免疫復合物。許多商業(yè)公司 銷售用于免疫復合物檢測和定量的診斷試劑盒。這些試劑盒是基于C1q與免疫復合物 的良好結(jié)合的能力,但不與單體免疫球蛋白的顯著結(jié)合。