一、為什么你公司液體培養(yǎng)基1640顏色發(fā)黃,是pH值不對(duì)嗎?
不是。因?yàn)榕浞皆颍?640為堿酚紅型,其中酚紅的濃度只有DMEM的四分之一,所以是因?yàn)榉蛹t濃度低,而非PH值低。
二、液體培養(yǎng)基可以放-20℃保存嗎?
不可以!因?yàn)樵?20℃下,培養(yǎng)基中的鹽容易析出,培養(yǎng)基融化后,有的鹽可能無(wú)法重新溶解,從而導(dǎo)致培養(yǎng)基滲透壓降低,培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),細(xì)胞容易破裂而死亡。
三、為何培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中,顏色會(huì)偏暗紅色,且pH值越來(lái)越偏堿性?
培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中, 培養(yǎng)基內(nèi)之CO2 會(huì)逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來(lái)越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red) 的顏色也會(huì)隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果, 將造成細(xì)胞生長(zhǎng)停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時(shí), 可以通入無(wú)菌過(guò)濾之CO2, 以調(diào)整pH 值。
四、如何選用培養(yǎng)基? 選擇培養(yǎng)基沒有一定標(biāo)準(zhǔn),有幾點(diǎn)建議可供參考:
1. 建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞shouxuan的培養(yǎng)基。可以查閱文獻(xiàn),或在購(gòu)買細(xì)胞株時(shí)咨詢。
2. 根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)的需要來(lái)選擇培養(yǎng)基。如小鼠細(xì)胞株多選1640;進(jìn)行細(xì)胞雜交、基因轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn),可選擇IMDM。
3. 用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細(xì)胞,觀察其生長(zhǎng)狀態(tài),可以用生長(zhǎng)曲線、集落形成率等指標(biāo)判斷,根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇最佳培養(yǎng)基,這是最客觀的方法,但比較繁瑣。
4.ATCC(American Type Culture Collection)收集了絕大多數(shù)細(xì)胞的詳細(xì)資料。打開ATCC網(wǎng)頁(yè)的Cells and hybridomas鏈接,輸入細(xì)胞名稱就可以搜索ATCC的細(xì)胞數(shù)據(jù)庫(kù)。數(shù)據(jù)庫(kù)中有每一種細(xì)胞的詳細(xì)描述,包括細(xì)胞的來(lái)源,培養(yǎng)和凍存條件,以及相關(guān)文獻(xiàn)等資料。
五、新配制的液體培養(yǎng)基能保存多久?
我們建議將新配制的培養(yǎng)基放置于4℃,避光保存盡量在一周內(nèi)使用完畢。培養(yǎng)基越新鮮越好。
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