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一、什么是轉(zhuǎn)染?

從廣義上講,轉(zhuǎn)染是采用除病毒感染外的其他方法將核酸(DNA或RNA)人工導入細胞的過程。采用各種化學、生物學或物理方法導入外源性核酸會改變細胞的特性,從而實現(xiàn)細胞基因功能和蛋白質(zhì)表達研究。轉(zhuǎn)染后,導入的核酸可以瞬時性地存在于細胞內(nèi),只表達一段時間且不會復制,也可以穩(wěn)定地整合至受體基因組內(nèi),隨著宿主基因組的復制而復制,各種基因輸送系統(tǒng)采用的術(shù)語與該領(lǐng)域的技術(shù)進展步調(diào)一致,并進一步區(qū)分不同的方法和細胞類型。

1、轉(zhuǎn)染

轉(zhuǎn)染通常是指將核酸輸送到真核細胞,或者更明確地說是輸送到動物細胞內(nèi)。術(shù)語轉(zhuǎn)染一般用來表示原核生物感染病毒或噬菌體中病毒核酸的攝取,導致成熟病毒顆粒的感染和生成。但該術(shù)語現(xiàn)在的含義包括將外源性核酸人工導入細胞內(nèi)。

2、轉(zhuǎn)化

轉(zhuǎn)化通常用來描述細菌、非動物真核細胞和植物細胞中非病毒DNA的轉(zhuǎn)移。但是,轉(zhuǎn)化還表示引起動物細胞表型發(fā)生性改變的特定事件或一系列事件,暗示遺傳不穩(wěn)定性及發(fā)展為癌癥狀態(tài)。盡管從這個意義上講,轉(zhuǎn)化可以源于轉(zhuǎn)化病毒的感染或基因轉(zhuǎn)染,也可以同時發(fā)生或在外來刺激物(如離子輻射或化學致突變源)刺激下產(chǎn)生。因此,在描述外源性遺傳物質(zhì)導入時,應避免將該術(shù)語用于動物細胞。

3、轉(zhuǎn)導

轉(zhuǎn)導用于描述病毒介導的DNA轉(zhuǎn)移。但是,術(shù)語轉(zhuǎn)染也可以表示細胞的病毒核酸(從真核細胞病毒或噬菌體中分離)感染。

轉(zhuǎn)染的兩個主要目的是生成重組蛋白,或特異性地提升或抑制轉(zhuǎn)染細胞中的基因表達。因此,轉(zhuǎn)染是一種功能強大的分析工具,可用于基因或基因產(chǎn)物的功能和調(diào)控研究,用于生成轉(zhuǎn)基因生物,并用作基因治療方法。

轉(zhuǎn)染 轉(zhuǎn)化 轉(zhuǎn)導區(qū)別：

1、作用不同

轉(zhuǎn)化是某一基因型的細胞從周圍介質(zhì)中吸收來自另一基因型的細胞的DNA而使它的基因型和表現(xiàn)型發(fā)生相應變化的現(xiàn)象。

轉(zhuǎn)導由噬菌體將一個細胞的基因傳遞給另一細胞的過程。

轉(zhuǎn)染是真核細胞主動或被動導入外源DNA片段而獲得新的表型的過程。

2、特點不同

轉(zhuǎn)化是細菌間遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移的多種形式中最早發(fā)現(xiàn)的一種，它不同于通過噬菌體感染傳遞遺傳物質(zhì)的轉(zhuǎn)導以及通過細菌細胞的接觸而轉(zhuǎn)移DNA的細菌接合。

轉(zhuǎn)導是細菌之間傳遞遺傳物質(zhì)的方式之一。其具體含義是指一個細胞的DNA或RNA通過病毒載體的感染轉(zhuǎn)移到另一個細胞中。

轉(zhuǎn)染關(guān)鍵因素都是用氯化鈣處理大腸桿菌細胞，以提高細胞膜的通透性，從而使外源DNA分子能夠容易進入細胞內(nèi)部。

3、功能不同

轉(zhuǎn)化的研究不但在理論上有重要意義，而且在基因工程中是將質(zhì)?；虿《据d體引入宿主細胞的一種重要手段。它也可能為育種和遺傳性疾病的基因治療提供新的途徑。

應用轉(zhuǎn)導是細菌的遺傳學研究中的一種常用研究手段。它可以用來在細菌間轉(zhuǎn)移基因，進行互補測驗，進行基因定位，特別是通過共轉(zhuǎn)導方法進行基因的精細結(jié)構(gòu)分析。

轉(zhuǎn)染技術(shù)的選擇對轉(zhuǎn)染結(jié)果影響也很大，許多轉(zhuǎn)染方法需要優(yōu)化DNA與轉(zhuǎn)染試劑比例，細胞數(shù)量，培養(yǎng)及檢測時間等。