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1. 乙醇預處理
添加乙醇到每個孔中，接觸乙醇后，膜立刻變成灰色，表明PVDF被激活了。如果同時包被幾塊板，建議一次處理1-2塊板，馬上進入下一步。
乙醇濃度和處理時間非常關鍵：
?MSIP和IPFL板--添加15μl 35%乙醇到每個孔中，乙醇在每個孔中停留時間不要超過1分鐘。
?MAIPSWU 板--添加50μl 70%乙醇到每孔中，乙醇在每個孔中停留時間不要超過2分鐘。
2. 無菌水清洗
清空板子，用無菌水清洗5次200 μl/well。如果使用MSIP或IPFL板，可不用清空板子直接把水添加到孔中。
3. 加入包被抗體
清空板子，添加PBS稀釋抗體100μl/well，一般推薦濃度10-15μg/ml(1-1.5μg抗體/well), 4℃過夜。
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